Elementos para el análisis de riesgo de las vacunas (de ARNm modificado y/o adenovirus recombinantes) contra el SARS-CoV-2. ON: 28/08/2021

INFORME ESPECIAL

El presente artículo es un trabajo de revisión bibliográfica, que intenta realizar un aporte que permita un debate transparente frente a la escasez de información sobre las Nuevas Vacunas (NV) de ARNm modificado o vectorizadas, con tecnologías de ADN recombinante contra la COVID-19. Estas NV son variantes de las llamadas “terapias génicas”, que por su definición y por los procedimientos empleados en su diseño, en su síntesis y en sus mecanismos de acción pueden ser consideradas vacunas transgénicas. El artículo destaca algunos elementos relevantes para el análisis de riesgo y, al mismo tiempo, presenta algunas características de estas NV. El trabajo es el resultado de un estudio colectivo e interdisciplinario de la UCCSNAL ante la preocupación sobre los riesgos de estas NV, cuyos impactos potenciales no han sido evaluados en profundidad. En consecuencia, consideramos necesario apelar al principio precautorio ante la administración masiva de las NV a la población.

Publicado en UCCSNAL, Agosto 2021.

Introducción

La mayoría de las vacunas en uso actualmente son producidas a partir de plataformas tecnológicas (generalmente virus o bacterias atenuados, inactivados o sus partes como antígenos) probadas en estudios clínicos de calidad y a lo largo del tiempo. Si bien algunas de las vacunas contra el SARS-CoV-2 emplean estas tecnologías, otras emplean ADN vectorizado (utilizando generalmente diferentes adenovirus, AdV, como vectores de ADN recombinante), o ARNm modificado bioquímicamente (ARNm*, el asterisco es por “modificado”) (Teijaro y Farber, 2021). Estos tratamientos masivos con biofármacos de tipo genético son similares a las terapias génicas, pero dado que buscan entrenar al sistema inmunitario para que la persona expuesta al virus esté protegida de sus efectos, las denominaremos “nuevas vacunas” (NV). Del mismo modo que las terapias génicas involucran diversas tecnologías de ADN recombinante, sus riesgos e impactos potenciales en la salud no han sido evaluados en profundidad, habida cuenta que estas NV se diseñaron, fabricaron, probaron en fase clínica e implementaron masivamente en menos de un año.

Al ser tratamientos novedosos y todavía en fase experimental, es pertinente y necesario elaborar hipótesis de evaluación de los riesgos involucrados, en el marco de las etapas interdependientes que conforman el llamado análisis y manejo del riesgo. Formular el razonamiento hacia los hipotéticos efectos adversos -en este caso vinculados a la salud- y asociar este análisis con la información publicada (muchas veces escasa), puede permitirnos aceptar o rechazar las hipótesis de riesgo planteadas y gestionar dichos riesgos identificados.

Este trabajo es el resultado de una investigación conjunta e interdisciplinaria de la Unión de Científicos Comprometidos con la Sociedad y la Naturaleza de América Latina (UCCSNAL) ante nuestra preocupación sobre los riesgos que involucran las actuales vacunas recombinantes con las que se propone enfrentar el SARS-CoV-2. Se ha focalizado en realizar una exhaustiva revisión bibliográfica sobre aspectos que deberían ser considerados ante una vacunación masiva. Su propósito general es brindar información clara a la ciudadanía y a la comunidad científica -como resultado de investigaciones interdisciplinarias- con el fin de aportar e incentivar un diálogo social y científico real; y sus objetivos específicos refieren a descripciones estructurales del objeto de estudio, sus riesgos y posibles impactos. Tiene como antecedente próximo la Declaración de UCCSNAL sobre nuevas vacunas genéticas o transgénicas en el contexto de SARS COVID-19 (UCCSNAL, 2020).

La evaluación de riesgos y la implementación masiva de estas NV deben realizarse acorde al principio precautorio: ante la ausencia de certeza o información científica sobre posibles consecuencias dañosas se deben adoptar medidas preventivas (Cafferatta, 2004; Sozzo, 2008; Mariño López, 2009, 2019; Mirande, 2009) e informar a la población en forma transparente y efectiva sobre todo posible daño o riesgo de daño (Sozzo, 2015; Mirande, 2020). Diversas normas jurídicas internacionales e internas de cada país son aplicables al respecto y justifican tales medidas. La perspectiva precautoria es el punto de referencia jurídico en cuanto a la adopción de tales medidas (Röttger-Wirtz, 2020). La jurisprudencia ha comenzado a prescindir de la evidencia plena o absoluta sobre tales riesgos. En consecuencia, se debe garantizar y proteger el derecho a la salud y el control de seguridad y eficacia de este tipo de NV. Las corporaciones farmacéuticas deben informar precautoriamente sobre los procedimientos de su producción y evaluación (UCCSNAL, 2020).

La autorización e implementación masivas de estas NV sin evaluar en profundidad posibles daños, sin adoptar medidas preventivas, sin evaluar debidamente su eficacia y sin ponderar otro tipo de terapias pese a la incerteza y ausencia de información científicas sobre sus riesgos e impactos puede implicar una antijurídica inversión del principio precautorio.

Metodología

En el entendido de que se busca como objetivo una inmunidad colectiva (de “rebaño”) mediante una campaña de inoculación masiva, los elementos elegidos para el análisis se encuadran en las siguientes etapas: (1) el contexto sanitario, biológico e histórico; (2) el diseño experimental (fase preliminar de I+D contenida en laboratorio) de los principios activos, vectores y adyuvantes; (3) la fabricación a gran escala y distribución; y (4) los posibles efectos secundarios de estos tratamientos. La metodología utilizada consistió en realizar búsquedas bibliográficas (artículos científicos, reportes, informes, comunicaciones) con palabras clave en las bases de datos de publicaciones PubMed y Google Scholar y el buscador web DuckDuckGo. No se refieren en este trabajo las informaciones presentes en las patentes ni los informes oficiales de las agencias reguladoras y de las empresas involucradas, por ser de acceso público.

Aspectos comunes, el contexto sanitario, biológico e histórico

El agente etiológico de la COVID-19 es el virus SARS-CoV-2 (SCV2), virus a ARN monocatenario de polaridad positiva que pertenece a la familia de los betacoronavirus (Banerjee et al., 2020; Pillaiyar et al., 2020; V’kovski et al., 2021). Presenta un ciclo biológico activo íntimamente vinculado a la biología de las células que infecta, a través de la interacción de un trímero de la proteína spike (PS) viral con el receptor de membrana ACE2 celular. La ACE2 (enzima convertidora de angiotensina 2) se expresa en varios tejidos humanos, detectándose en altas concentraciones en enterocitos del tracto gastrointestinal, vías urinarias y tejido reproductivo, donde produce las citopatías más conspicuas, pero se encuentra muy poco presente en el sistema respiratorio (nasofaringe, bronquios). Por lo tanto, el SCV2 no puede catalogarse como un virus respiratorio, sino politrópico y sistémico, que provoca alteraciones sanguíneas y sobreactivación del sistema inmunitario. Otras peculiaridades de la compleja biología del SCV2 son las siguientes: parece interactuar (Petruk et al., 2020) y replicarse en la microbiota intestinal (con un comportamiento tipo bacteriófago; Petrillo et al., 2021), y es capaz de formar minicírculos de ARN, al igual que el MERS-CoV y el SARS-CoV-1 (Cai et al., 2021), lo que puede resultar relevante en cuanto a su patología, diagnóstico, y tratamiento. Otra particularidad de este virus es la presencia de una inserción de cuatro aminoácidos (PPAR) en la PS, lo que permite el corte y activación de esta proteína por medio de las enzimas proteasas furina y TMPRSS2 (Andersen et al., 2020). En efecto, la diversidad funcional de las PS contribuye al tropismo del huésped y del tejido, a la transmisibilidad y a la patogenicidad de los diferentes coronavirus. Esta glicoproteína spike juega un rol central en la patología de la COVID-19, ya que media la entrada del virus en las células del hospedador y sus efectos citopáticos (coagulopatía y fusión celular por formación de sincitios; para más detalles ver Buchrieser et al., 2020; Buonvino y Melino, 2020; Nguyen et al., 2020; Xia, 2021).

Tras la unión del receptor a la membrana celular después de la endocitosis, las proteínas de fusión experimentan una transición conformacional espectacular (White et al., 2008). Es una proteína que provoca efectos mayores en las células a través de la activación de vías de transducción de señales en células epiteliales (aunque hay otras proteínas virales con mayor actividad; Mizutani, 2007; Patra et al., 2020), lo que se ha estudiado en detalle (pero no sólo) en las células pulmonares (Suzuki et al., 2020; Suzuki y Gychka, 2021). Muy recientemente se ha reportado que la subunidad S1 de PS atraviesa la barrera hematoencefálica en ratones (Rhea et al., 2021). Al mismo tiempo, se ha observado una alta homología de secuencia entre las regiones de la PS con las proteínas sincitinas humanas (codificadadas por el retrovirus endógeno humano HERV-W), y cuya expresión se localiza en el sincitiotrofoblasto de la placenta (Frendo et al., 2003; Gallaher, 2020).

Esta PS ha sido elegida por todas las vacunas propuestas contra el SCV2 como antígeno o inmunógeno, al ser reconocida por los anticuerpos del sistema inmune (y así neutralizar a la partícula viral infectiva; Teijaro y Farber, 2021), una vez que la PS haya sido producida en suficientes cantidades y presentada en la membrana celular luego de la inoculación, ya sea por el ADN recombinante presente en las vAdV, o por la intervención del ARNm*, según la plataforma tecnológica empleada. En los ARNm* la zona codificante se encuentra mutada para sustituir dos aminoácidos (lisina y valina) por dos prolinas (K986P y V987P), lo que hace que la proteína S* sintetizada adquiera una conformación “pre-fusión”, más rígida y estable, con mayor poder inmunogénico (Pallesen et al., 2017). Cabe destacar que recientes estudios sugieren el uso de otros inmunógenos (en particular la proteína N de la nucleocápside), con menor toxicidad que la PS (Zeng et al., 2020; Gao et al., 2021). En la Tabla 1 se reseñan los riesgos asociados al uso de la PS como inmunógeno.

Tabla 1. Elementos de análisis de riesgo para el uso de la PS como inmunógeno de las NV

Aspecto considerado	Riesgo asociado	Referencias
Proteína Espiga S por Spike (PS)	Citotoxicidad.	Tanmay et al. (2021).
PS	Activación vías de transducción de señales intracelulares.	Mizutani (2007); Patra et al. (2020).
PS*(proteína S modificada)	Conformación prefusión, aumento de la vida media	Pallesen et al. (2017).
PS	Pasaje BHE1	Rhea et al. (2021).
PS	Autoinmunidad por homología con proteínas endógenas (ej. sincitinas)	Frendo et al. (2003); Gallaher (2020); Suzuki y Gychka (2021).
PS	Trombosis, ADE2, VAED3, VAERD4, VIPIT5, VITT6	Zhang et al. (2020); von Hundelshausen et al. (2021).
IgG7 anti S	ALI8	Liu et al. (2019).

Referencias: *: modificado; S*: PS mutada para adoptar la conformación pre-fusión; 1. BHE: barrera hematoencefálica; 2. ADE: enfermedad amplificada por anticuerpos; 3. VAED: enfermedad amplificada asociada a la vacuna, vaccine-associated enhanced disease, 4. VAERD: enfermedad respiratoria amplificada asociada a la vacuna, vaccine-associated enhanced respiratory disease; 5. VIPIT: trombocitopenia inmune protrombótica inducida por vacuna, vaccine-induced prothrombotic immune thrombocytopenia; 6. VITT: trombosis con trombocitopenia inducida por vacuna, vaccine-induced thrombosis with thrombocytopenia. 7. IgG: Inmunoglobulina G; 8. ALI: daño pulmonar agudo, acute lung injury. Fuente: elaboración propia.

Los antecedentes históricos para el desarrollo de vacunas (de cualquier tipo) contra los coronavirus (CV) muestran que hasta el año 2020 no se habían podido desarrollar e implementar vacunas seguras contra ellos (ver p. ej. Kam et al., 2007; Clay et al., 2012; Tseng et al., 2012; Takano et al., 2019).

Nuevas vacunas de ácidos nucleicos o genéticas

Por definición y por los procedimientos empleados en su diseño son vacunas transgénicas, tanto en su síntesis como en sus mecanismos de acción. El mensaje codificante se introduce por inyección (técnicamente llamada “transfección”) mediante un fragmento de ácido nucleico (ADN recombinante sobre adenovirus vectorizado o ARN modificado y encapsulado en nanopartículas) que contiene la información para que la persona inoculada sintetice en sus células una proteína que actuaría como inmunógeno para inducir una respuesta inmune. Estas tecnologías de transfección celular, que necesitan del uso de vectores o carriers, ya que no entran espontáneamente en las células (se utilizan virus o nanopartículas lipídicas), son una variante de las llamadas “terapias génicas”, que se han venido implementando en ensayos desde hace más de veinte años (Goswami et al., 2019), los cuales han generado importantes dudas acerca de ser lo suficientemente seguras (Jafarlou et al., 2016).

Nuevas vacunas a vector viral (adenovirus) recombinante

Las vacunas con vectores virales utilizan una versión modificada de un virus (el vector) para introducir instrucciones genéticas a las células. Se han llevado a cabo ensayos clínicos en humanos para vacunas con vectores virales contra diversas enfermedades infecciosas, como el virus del Zika, los virus de la gripe, el virus sincitial respiratorio, el VIH y la malaria, pero el único antecedente de nuevas vacunas a vector viral (adenovirus) recombinante (NV a rAdV) aprobada para uso médico en humanos fue la primera dosis de la llamada Zabdeno/Mvabea, desarrollada contra el virus del ébola (EMA, 2020; CDC, 2021).

En las NV analizadas en el presente trabajo se emplean vectores de adenovirus (AdV) como vehículos de ADN recombinante (ADNr) que codifica el antígeno. Son construidas insertando el ADNr codificante de la proteína S (a veces modificada, ver antes S*) en dichos vectores virales recombinantes(rAdV) a los que se les ha removido los genes de virulencia, por lo que no serían infectivos. Sin embargo, estos rAdV, al igual que sus contrapartes “salvajes”, entran al núcleo de las células, donde su ADN se transcribe en ARNm. Se ha demostrado que los vectores rAdV, aunque son incompetentes para su replicación (lo que los hace no infectivos y limita su capacidad temporal de activación del sistema inmuntario; Custers et al., 2021), pueden integrarse aleatoriamente en el ADN del hospedador con una frecuencia baja, pero no insignificante, del 0,001 al 1% de las células infectadas (Mitani y Kubo, 2002). Esta integración al ADN nuclear es algo deseado en las terapias génicas “convencionales”, pero en este caso (de uso como NV) es una fuente potencial de genotoxicidad por inserción mutacional. La inserción de ADN foráneo en el ADN nuclear de las células de la línea germinal, y por la tanto la alteración genética transgeneracional, es algo que tampoco puede descartarse (Tsukui et al., 1996). Sin embargo, la Agencia Europea de Medicamentos (EMA, 2006) descarta que esto pueda constituir un riesgo a evaluar.

Las NV a AdV también contienen propiedades adyuvantes inherentes, que residen en la partícula del virus recombinante que codifica el ADN del inmunógeno. Tras la inyección, estas partículas de AdV se dirigen a las células inmunitarias innatas (como las células dendríticas y macrófagos) y estimulan la respuesta inmunitaria innata, al activar múltiples receptores intracelulares de reconocimiento de patrones, incluidos los que se unen al ADN de doble cadena, induciendo la secreción de interferón de tipo I (Teijaro y Farber, 2021).

Dado que las infecciones a AdV son comunes (responsables de un buen porcentaje de las afecciones respiratorias, resfríos y otras patologías o malestares frecuentes) es probable que nuestro sistema inmunitario pueda inactivar y/o reaccionar fuertemente ante un virus rAdV. Por este motivo algunas NV utilizan rAdV provenientes de otras especies (como la ChAdOx1, que utiliza un AdV de chimpancé), pero otras utilizan vectores provenientes de AdV humanos (p. ej. Ad5, Ad26). Para la fabricación de estas NV a rAdV se utilizan cultivos celulares derivados de células animales (Pollard y Bijker, 2021). Los riesgos asociados a este tipo de vacunas se reseñan en la Tabla 2.

Tabla 2. Elementos de análisis de riesgo para las NV a AdV recombinante.

Etapa	Aspecto considerado	Riesgo asociado	Gestión o mitigación	Referencias
Diseño principio activo (rAdV)	ADNr1	Inserción mutacional de ADN al genoma. Escape de variantes del AdV.	Rediseño	Mitani y Kubo (2002); EMA (2006).
	Vector AdV (rAdV2, actúa además como adyuvante)	Inmunogenicidad del AdV por memoria del sistema inmune.	Rediseño	Teijaro y Farber (2021).
Producción	Escala3: cultivo celular	Contaminantes del cultivo.	Control de calidad. Buenas Prácticas de Manufactura (GMP)	Pollard y Bijker (2021).
Transporte, almacenamiento, distribución	Temperaturas bajas	Degradación del producto.	Control de calidad de la purificación de la vAdV.	(sin citas)
Efectos no deseados	A corto plazo	Anafilaxis, VAED4, VAERD5, VIPIT6, VITT7	Crítico. Control de calidad in situ.	Huisman et al. (2009); Lee et al. (2020); von Hundelshausen et al. (2021).
		Aumento del riesgo de contraer VIH.		Duerr et al. (2012); Fauci et al. (2014).
		Integración al genoma.		Tsukui et al. (1996); EMA (2006); Desfarges y Ciuffi (2012).
		Otros derivados de cambios en el epigenoma y/o proteosoma	Análisis por técnicas “ómicas”8, por ej. análisis por secuenciación del ADN y/o ARN.	(sin citas)
	Medio / largo plazo	VAED4, VAERD5, VIPIT6, VITT7		Huisman et al. (2009); Takano et al. (2019); Lee et al. (2020); Munoz et al. (2021); von Hundelshausen et al. (2021).
		Otros (p. ej. cebado patogénico, pathogenic priming)		Kostoff et al. (2020); Lyons-Weiler (2020).

Referencias: 1. ADNr: ADN recombinante; 2. rAdV: adenovirus recombinante; 3. Escala: refiere al escalamiento en órdenes de magnitud de las cantidades producidas y a la utilización o no de las Buenas Prácticas de Manufactura aplicadas a estos compuestos; 4. VAED: enfermedad amplificada asociada a la vacuna, vaccine-associated enhanced disease, 5. VAERD: enfermedad respiratoria amplificada asociada a la vacuna, vaccine-associated enhanced respiratory disease; 6. VIPIT: trombocitopenia inmune protrombótica inducida por vacuna, vaccine-induced prothrombotic immune thrombocytopenia; 7. VITT: trombosis con trombocitopenia inducida por vacuna, vaccine-induced thrombosis with thrombocytopenia; 8. “ómicas”: refiere a las técnicas de alta performance (secuenciación genómica, genómica funcional o transcriptómica, proteómica, metabolómica) y análisis basados en biología de sistemas. Algunos campos se encuentran en blanco ante la falta de datos disponibles. Ejemplos de NV a rAdV analizadas: Oxford/Astra Zéneca (ChAdOx1 o AZD1222, proteína S sin modificar), Janssen/Johnson & Johnson (Ad26.COV2-S o JNJ-78436735, S*), Sputnik (Гам-КОВИД-Вак, o Gam-COVID-Vac, S sin modificar), entre otras. Fuente: elaboración propia.

Nuevas vacunas a ARN mensajero modificado (ARNm*)

No hay antecedentes de uso de este tipo de vacunas ni en seres humanos ni en animales. Este tipo de vacunas son fabricadas in vitro en sistemas libres de células. A diferencia de las terapias génicas basadas en ADN (ver más arriba), el ARNm no necesita entrar en el núcleo para ejercer su función, lo hace en el citoplasma, por ello (tanto para las células que no se dividen como para las que se dividen lentamente) las terapias con ARNm parecen a priori más eficaces que las que utilizan ADN. En cuanto a su seguridad (y a diferencia del ADN; ver el trabajo de Hacein-Bey-Abina et al., 2003), el ARNm no se integra como tal en el genoma del hospedador, y a no ser que ocurra un evento de retrocopia al ADN e inserción, no habría riesgo de genotoxicidad por inserción mutacional; a esto se agregaría su expresión transitoria (debido a su corta vida media), lo que resulta importante para la estabilidad de las células transfectadas (Zarghampoor et al., 2019). Al mismo tiempo, diversas investigaciones revelan que las terapias génicas (ahora implementadas como vacunas) basadas en ARNm ensayadas hasta ahora han presentado varios problemas importantes, a saber: la corta vida media del ARNm y de la proteína codificada por este, el bajo nivel de transcripción in vitro, citotoxicidad severa del ARNm, y una activación de la respuesta inmunitaria tras la transfección con el ARNm (Lu y Li, 2012; Zarghampoor et al., 2019).

El principio activo ARNm* de estas NV tiene la estructura de un ARNm celular típico pero con importantes modificaciones bioquímicas. Estos ARNm* presentan diversas características peculiares (tomando como ejemplo el caso específico de la NV de BioNTech/Pfizer):

1) En su extremo 5´ un capuchón o casquete (en inglés cap, cuya función es proteger al ARNm* de la degradación por enzimas llamadas exorribonucleasas 5´-3´), el que ha sido modificado bioquímicamente a m7G+m3′-5′-ppp-5′-Am (bastante diferente del natural m7G; Weng et al., 2020).

2) Una zona 5´UTR de unos cincuenta ribonucleótidos (es una zona no codificante, que no es traducida a proteína, que cumple una función regulatoria), derivada y optimizada (a los efectos de asegurar una alta tasa de traducción) a partir de la secuencia del gen de alfa globina humana (proteína con alta tasa de síntesis celular) (Asrani et al., 2018), en la que los ribonucleótidos normales U (uracilos) han sido cambiados por ᴪ (1-metil-3´-pseudouridina) con el fin de impedir la activación de la respuesta inmune innata intracelular medidada por receptores del tipo Toll (TLR) (Karikó et al., 2005; Borchardt et al., 2020).

3) En la zona codificante (cuya función es portar la información para la síntesis de la proteína –en este caso el antígeno-, y que se traduce o “lee” en los ribosomas utilizando el código genético, por tripletes de nucleótidos o codones) llamada CDS, se encuentra el mismo cambio de todas las U por ᴪ. Se ha realizado además una ingeniería reversa de la secuencia codificante para la proteína S del virus con el fin de diseñar la plataforma de síntesis del ARNm* (Hubert, 2021; Jeong et al., 2021), con la optimización de los codones y el aumento en el contenido en GC para su lectura más eficaz por los ribosomas en células humanas (Kudla et al., 2006). La zona codificante tiene las mutaciones K986P y V987P, lo que hace que la proteína S* adquiera la conformación “pre-fusión” antes señalada (Pallesen et al., 2017).

4) Contiene otra zona 3´UTR que tampoco es codificante, con funciones en la estabilidad, exportación, eficiencia de traducción y acción regulatoria (a través de la unión de ARN regulatorios, como lo miRNA) (Zarghampoor et al., 2019). El extremo 3´de esta NV fue tomado del ARNm del potenciador amino-terminal de división (AES, amino-terminal enhancer of split) y el ARN ribosómico 12S mitocondrial, para conferirle mayor estabilidad al ARN y una alta expresión de la proteína codificada (Hubert, 2020).

5) Finalmente, se introdujeron cambios en la región terminal 3´, que consiste en una secuencia repetida de adenosinas (A), la llamada “cola poliA” (cuya función es la protección del ARNm de la degradación por exorribonucleasas que digieren el ARNm en la dirección 3´-5´). En el ARNm*, esta secuencia, de cerca de 120 nucleótidos de longitud, es interrumpida en la posición 30 por una secuencia linker GCAUAUGACU, seguida de 100 As, cuya función es estabilizar al ADN plasmídico circular que codifica a este ARNm* y que sirve como molde (una vez cortado y linerizado) para su transcripción (Hubert, 2020, 2021).

Todas estas modificaciones apuntan a obtener una mayor cantidad del antígeno S*, por un lado a través de una mayor tasa de traducción del ARNm*, y por el otro al evitar la activación de la respuesta inmune innata intracelular (provocada por el ARNm* foráneo) mediada por el receptor de Toll y otros sensores inmunitarios intracelulares, lo que a su vez podría activar al Interferón tipo I, inhibiendo la traducción (síntesis proteica) de la proteína S* (Pardi et al., 2018; Teijaro y Farber, 2021).

En cuanto a los excipientes/adyuvantes de la NV a ARNm*, en éstas no se utilizan excipientes/adyuvantes de origen animal o humano. Una de las características del ARNm es su potencial para actuar como auto-adyuvante (Kowalski et al., 2019). El ARNm* se encuentra recubierto por una capa de partículas nanolipídicas (NLP), compuestas principalmente por lípidos ionizables (algunos de ellos completamente nuevos, sin historial de uso seguro en inoculaciones), colesterol, fosfolípidos y polietilenglicol (PEG) anclados a lípidos. Además de su papel en la protección del ARNm*, estas moléculas facilitan la captación celular, mejoran la salida de los endosomas y permiten su liberación en el citoplasma. Si el ARNm* no está completo, cabe la posibilidad de que pueda llegar a actuar como ARN de interferencia (Tinari, 2021). Las NLP también pueden proteger a las moléculas de ARNm para que no sean reconocidas en los endosomas por los receptores TLR, lo que evita una activación excesiva del sistema inmunitario innato (Herrera et al., 2021). Las NLP llevan asociado al colesterol, para modular la fluidez y la permeabilidad de la membrana lipídica al mejorar el empaquetamiento de los lípidos (Eygeris et al., 2020). Las NLP podrían atravesar la barrera hematoencefálica (BHE) (Bondì et al., 2012); en ese caso, cabe considerar la posibilidad de que ello pueda provocar una respuesta inmune en el cerebro. Al mismo tiempo, es necesario considerar que el PEG es un potente alérgeno (Wylon et al., 2016). Para una revisión de sus componentes ver, por ejemplo, Crommelin et al. (2021). Los riesgos vinculados a este tipo de vacunas se ilustran en la Tabla 3.

Tabla 3. Elementos de análisis de riesgo para las NV a ARNm*

Etapa	Aspecto considerado	Riesgo asociado	Gestión o mitigación	Referencias
Diseño y uso del PA1 (ARNm*)	Ingeniería reversa de la CDS2	Mal plegamiento de S*3 Escape de variantes.	Ensayos biológicos. Optimizar efectividad/riesgo.	Weng et al. (2020); Vanden Bossche (2021).
	CDS: optimización de codones	Mal plegamiento de S*	Optimizar efectividad/riesgo.	Weng et al. (2020).
	CDS: aumento en %GC4	Mal plegamiento de S*	Optimizar efectividad/riesgo.	Weng et al. (2020).
	CDS: cambios de U5 por ᴪ6	Ganancia de función asociado a aumento de la vida media del ARNm* que llevaría a una sobreproducción de S*. Amortiguación de la respuesta inmunitaria innata. Reciclaje del ᴪ.	Optimizar efectividad/riesgo.	Potapov et al. (2018); Borchardt et al. (2020); Weng et al. (2020).
	Extremo 5´: capuchón o casquete (cap) modificado químicamente	Aumento de la vida media del ARNm, sobreproducción de S	Optimizar efectividad/riesgo.	Weng et al. (2020).
	Extremo 5´: cambios en la secuencia no codificante, cambios de U por ᴪ	Aumento de la vida media del ARNm, sobreproducción de S Unión de ARNs no codificantes regulatorios.	Optimizar efectividad/riesgo.	Weng et al. (2020).
	Extremo 3´: cambios en la secuencia no codificante	Unión de ARNs no codificantes regulatorios (p. ej. miRNAs7).	Optimizar efectividad/riesgo.	Weng et al. (2020).
	Extremo 3´, cola poliA: cambios en la secuencia	Aumento de la vida media del ARNm, sobreproducción de S.	Optimizar efectividad/riesgo.	Weng et al. (2020).
	Integridad del ARNm*	ARNm* y/o Proteína S o S* incompletos	Control de calidad. Buenas Prácticas de Manufactura (GMP).	Shyu et al. (2008).
	ADN molde remanente luego de la transcripción in vitro	Contaminación por ADN molde	Control de calidad. Buenas Prácticas de Manufactura (GMP).	Karikó et al. (1998) (ver además sección sobre NV a rAdVs y Tabla 2)
	Autorreplicación (no implementada aún)	Aumento de la vida media del ARNm, sobreproducción de S.	Optimizar efectividad/riesgo.	Brito et al. (2014).
*Diseño y uso de los transportadores (carriers) y adyuvantes*	NLP (nanopartículas lipídicas)	Toxicidad, CARPA8, Pasaje BHE9	Estudios de toxicidad y farmacocinética	Bahl et al. (2017); Teijaro y Farber (2021).
	PEG (polietilenglicol)	Inmunogenicidad, efectos sistémicos	Estudios de toxicidad y farmacocinética	Moderna’s stock market launch (2018); Stone et al. (2019); Banerji et al. (2021).
	Polisorbato 80	Inmunógeno	Estudios de toxicidad y farmacocinética	Stone et al. (2019); Banerji et al. (2021).
	Colesterol	Transporte plasmático y acceso a células	Estudios de biodisponibilidad	Crommelin et al. (2021).
Producción	Escala: producción y corte del molde de ADN	Eficiencia de la reacción. Calidad del producto.	Control de calidad	Weng et al. (2020).
	Escala: transcripción in vitro y modificaciones post.	Eficiencia de las reacciones. Calidad del producto. Contaminación con ADN y otros componentes de las reacciones.	Control de calidad (integridad del ARN, ausencia de ADN)	Weng et al. (2020).
	Escala: purificación del ARNm*	Eficiencia de la reacción. Calidad del producto final.	Crítico. Control de calidad de estabilidad e integridad del ARNm*.	Weng et al. (2020).
Transporte, Almacenamiento, Distribución	Temperturas muy bajas	Degradación del producto.	Crítico. Control de calidad in situ.	Bondi et al. (2012); Weng et al. (2020).
Dosis	Entre 10-100 ng.	A mayor dosis más cantidad de efectos adversos. Efectos sinérgico e/ ARNm*, NLPs y PEG.	Crítico. Optimizar efectividad/riesgo.	Sousa et al. (2021).
Efectos no deseados	A corto plazo	Anafilaxis, trombocitopenia, VAED10, VAERD11, VIPIT12, VITT13.		Huisman et al. (2009); Lee et al. (2020); Banerji et al. (2021); von Hundelshausen et al. (2021); Munoz et al. (2021). Actualización de datos14
		Reacciones autoinmunes.		Vadalà et al. (2017); Ehrenfeld et al. (2020); Akinosoglou et al. (2021).
		Reacciones locales o sistémicas.		Polack et al. (2020).
	A mediano o largo plazo	VAED10, VAERD11, VIPIT12, VITT13.		Huisman et al. (2009); Takano et al. (2019); Lee et al. (2020); von Hundelshausen et al. (2021).
		Integración al genoma.	Riesgo bajo pero no descartable a priori	Zarghampoor et al. (2019); Zhang et al. (2021).
		Otros derivados de cambios en el epigenoma y/o proteosoma.	Análisis por técnicas “ómicas”	(sin citas)
		Seguridad general a largo plazo.	Optimizar efectividad/riesgo.	Kostoff et al. (2020).

Referencias: 1. PA: Principio Activo: ARNm*, ARNm modificado bioquímicamente; 2. CDS: secuencia codificante (codyfing sequence); 3. S*: proteína S en versión prefusión S-2P; 4. %GC: % de bases G+C/A+U; 5. U: uracilo; 6. ᴪ : 1-metil-3´-pseudouracilo; 7. miRNA: microARN (regulatorios de la vida media del ARNm y la traducción); 8. CARPA: pseudoalergia no mediada por IgE; 9. BHE: barrera hematoencefálica; 10. VAED: enfermedad amplificada asociada a la vacuna, vaccine-associated enhanced disease; 11. VAERD: enfermedad respiratoria amplificada asociada a la vacuna, vaccine-associated enhanced respiratory disease; 12. VIPIT: trombocitopenia inmune protrombótica inducida por vacuna, vaccine-induced prothrombotic immune thrombocytopenia; 13. VITT: trombosis con trombocitopenia inducida por vacuna, vaccine-induced thrombosis with thrombocytopenia; 14. Datos actualizados en p. ej. https://coronavirus.jhu.edu/data, https://www.medalerts.org/vaersdb/index.php, www.ema.europa.eu, https://allaboutpharmacovigilance.org/. Algunos campos se encuentran en blanco ante la falta de datos disponibles. Ejemplos analizados de NV a ARNm*: BioNTech/Pfizer (también bajo el nombre de BNT162b2, Tozinameran, comirnaty) y mRNA-1273/Moderna. Fuente: elaboración propia.

Reflexiones finales

Este trabajo constituye un primer aporte que expone algunos elementos o puntos de control hipotéticos que consideramos relevantes para realizar un análisis de riesgo de estas nuevas vacunas y su adecuada gestión, que debe ser guiada por un estricto principio de precaución y protección de la salud pública.

Entendemos que es un aporte limitado –debido a la escasez de disponibilidad de datos y, a veces, de antecedentes publicados– pero necesario, en un escenario que evoluciona día a día en medio de importantes incertidumbres que podrían derivar, a mediano y largo plazo, en la ampliación de efectos adversos ya reportados, y nuevos imprevistos, de las vacunas génicas experimentales. Las poblaciones tienen derecho a conocer y decidir sobre estos riesgos, especialmente en el contexto de otras opciones de prevención y vacunación que no los implican.

Los análisis de riesgo que aborden los temas emergentes de los puntos planteados en este artículo y sus resultados, deberían ser parte de la base para informar debidamente a la población en el marco de un protocolo de consentimiento informado (Cardozo et al., 2021).

El hecho de vacunar masivamente durante una pandemia puede acarrear problemas de escape (por aparición de variantes virales) o interferencia viral (Vanden Bossche, 2021). Al momento de escribir este trabajo está apareciendo una serie de reacciones graves a estas NV, lo cual nos permite plantear una duda razonable y argumentada acerca de si en este contexto es pertinente este tipo de intervención masiva, planteada para todas las edades y condiciones fisiopatológicas, sin identificar claramente y discriminar grupos de riesgo.

Es relevante notar que la enfermedad causada por el SARS-COVID-2, la COVID-19, presenta, según la OMS, un índice de letalidad relativamente bajo en su promedio global, comparable al de la gripe común (Ionnaidis, 2021), aunque la tasa de letalidad es notablemente más alta en algunas regiones. Este último hecho está ligado, entre otros factores, a la presencia de comorbilidades, mayor edad en la población de las personas infectadas y otras causas, por lo que la UCCSNAL considera que más que ante una pandemia, estamos ante una sindemia: una convergencia sistémica de factores que debilita el sistema inmunológico.

Notas

1 Ninguna ha cumplido con todas las fases de investigación y desarrollo necesarias, a pesar de que hay cerca de 100 vacunas en ensayos clínicos (Zimmer et al., 2021).

2 Por una lista actualizada de estas vacunas en uso ver https://www.who.int/publications/m/item/draft-landscape-of-covid-19-candidate-vaccines y por una lista actualizada de sus efectos ver https://ourworldindata.org/covid-vaccinations (Mathieu et al., 2021)

3 La terapia génica es una intervención médica experimental que implica modificar el material genético (ADN) de células vivientes. Una de las metas de la terapia génica es proveer a las células de copias saludables de genes alterados o faltantes. Reemplazaría el tratamiento farmacológico tradicional, cambiando la composición genética de algunas de las células del paciente y haciendo que éstas ganen o pierdan cierta función a corregir. Para la inserción del material genético (ADN) en el genoma del receptor se utilizan otros ADN o ARN portadores, conocidos en la jerga científica como “vectores”. Los tipos más comunes de vectores utilizados en terapia génica son los virus, y dos de los tipos más empleados son los retrovirus (de ARN) y los adenovirus (ADN), que tratamos en este artículo. Si bien son efectivos como vectores, presentan diversos problemas, ya que pueden producir reacciones tóxicas, inmunes e inflamatorias severas, e integrarse al azar en el genoma. Recientemente, se han sumado como vectores las partículas nanolipídicas, también analizadas en este trabajo. Estos tratamientos son aún experimentales y transforman a la persona en un organismo genéticamente modificado, como mínimo en forma temporal.

4 La gestión de riesgos (traducción del inglés risk management) es un enfoque estructurado para manejar la incertidumbre relativa a una amenaza a través de una secuencia de actividades humanas que incluyen la identificación, el análisis y la evaluación de riesgo, para luego establecer las estrategias de su tratamiento. Estas últimas pueden incluir el transferir el riesgo a otra parte, evitar el riesgo (esto es, reducir su probabilidad o impacto a 0), reducir el impacto negativo del riesgo y aceptar algunas o todas las consecuencias de un riesgo particular mediante una decisión informada. El objetivo de la gestión de riesgos es reducir diferentes riesgos relativos a un ámbito preseleccionado a un nivel aceptado por la sociedad. Puede referirse a numerosos tipos de amenazas causadas por el medio ambiente, la tecnología, los seres humanos, las organizaciones y la política (Norma ISO 31000/20, Principios generales para la gestión de riesgos, 2018).

5 https://www.biodiversidadla.org/Recomendamos/Pronunciamiento-de-la-UCCSNAL-sobre-nuevas-vacunas-geneticas-o-transgenicas-en-contexto-de-SARS-COVID19.

6 A) Declaración de la Conferencia de las Naciones Unidas sobre el Medio Humano, celebrada en Estocolmo, entre los días 5 y 16 de junio de 1972. B) Declaración de Río de Janeiro de 1992 (principio 15) – Conferencia de las Naciones Unidas sobre Medio Ambiente y Desarrollo. C) Protocolo de Cartagena sobre Seguridad de la Biotecnología (Montreal – 2000). D) Acuerdo Regional sobre Acceso a la Información, la Participación Pública y el Acceso a la Justicia en Asuntos Ambientales en América Latina y el Caribe (Escazú – 2018). En Argentina: Ley Nro. 25.675, General del Ambiente, de 27/11/2002 (art. 4, inciso 4). En Brasil: Decreto Legislativo Nro. 1, de 03/02/1994 – Decreto Nro. 2.652, de 01/07/1998; Decreto Legislativo Nro. 2, de 03/02/1994 – Decreto Nro. 2.519, de 16/03/1998; la Ley Nro. 9.605 (art. 54). En Uruguay: Ley Nro. 17.283, de 28/11/2000, sobre Protección del Medio Ambiente (art. 6, literal B). Sobre estos y otros textos jurídicos internos e internacionales sobre precaución, puede consultarse Bravo (2003) y Cafferatta (2021).

7 Sentencias judiciales europeas referidas y analizadas en Röttger-Wirtz (2020).

8 Por ejemplo: adeno (virus), allergic, autoimmune(e/ity), “(antibody-dependent) enhancement”, “gene therapy”, germline, immune, immunogen(icity), integration, lipid, modifi(cation/ed), mRNA(-1273) , nanoparticle(s), “(pathogenic) priming”, pseudourid(ine/ylation), receptor, recombina(nt/tion), retrovirus, risk, safety, spike, stability, transfection, vector, entre otras; solas o combinadas.

10 Ver por ejemplo https://www.proteinatlas.org/ENSG00000130234-ACE2/tissue

11 Sin embargo, ver los trabajos de Hüser et al. (2017) y Song et al. (2020), por una posible complementación con AdV persitentes en tejidos y que podrían reactivarse.

12 Sin embargo, cabe destacar que se ha reportado una posible integración del ARN de SARS-CoV-2 en el genoma humano mediada por el retrotransposón LINE-1 (Zhang et al., 2021). Este hallazgo, de confirmarse (con otros trabajos independientes), puede llegar a ser sumamente relevante en la patología, diagnóstico y tratamiento de la COVID-19.

Referencias

Akinosoglou, K., Tzivaki, I. y Marangos, M. (2021). Covid-19 vaccine and autoimmunity: awakening the sleeping dragon. Clinical Immunology, 226, 108721. https://doi.org/10.1016/j.clim.2021.108721

Andersen, K. G., Rambaut, A., Lipkin, W. I., Holmes, E. C. y Garry, R. F. (2020). The proximal origin of SARS-CoV-2. Nature Medicine, 26(4), 450-452. https://doi.org/10.1038/s41591-020-0820-9

Asrani, K. H., Farelli, J. D., Stahley, M. R., Miller, R. L., Cheng, C. J., Subramanian, R. R. y Brown, J. M. (2018). Optimization of mRNA untranslated regions for improved expression of therapeutic mRNA. RNA Biology, 15(6), 756-762. https://doi.org/10.1080/15476286.2018.1450054

Bahl, K., Senn, J. J., Yuzhakov, O., Bulychev, A., Brito, L. A., Hassett, K. J., Laska, M. E., Smith, M., Almarsson, Ö., Thompson, J., Ribeiro, A. M., Watson, M., Zaks, T. y Ciaramella, G. (2017). Preclinical and clinical demonstration of immunogenicity by mRNA vaccines against H10N8 and H7N9 influenza viruses. Molecular Therapy, 25(6), 1316-1327. https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2017.03.035

Banerjee, A. K., Blanco, M. R., Bruce, E. A., Honson, D. D., Chen, L. M., Chow, A., Bhat, P., Ollikainen, N., Quinodoz, S. A., Loney, C., Thai, J., Miller, Z. D., Lin, A. E., Schmidt, M. M., Stewart, D. G., Goldfarb, D., De Lorenzo, G., Rihn, S. J., Voorhees, R. M., Botten, J. W., … y Guttman, M. (2020). SARS-CoV-2 disrupts splicing, translation, and protein trafficking to suppress host defenses. Cell, 183(5), 1325-1339.e21. https://doi.org/10.1016/j.cell.2020.10.004

Banerji, A., Wickner, P. G., Saff, R., Stone, C. A., Jr, Robinson, L. B., Long, A. A., Wolfson, A. R., Williams, P., Khan, D. A., Phillips, E. y Blumenthal, K. G. (2021). mRNA vaccines to prevent COVID-19 disease and reported allergic reactions: current evidence and suggested approach. The Journal of Allergy and Clinical Immunology in Practice, 9(4), 1423-1437. https://doi.org/10.1016/j.jaip.2020.12.047

Bondì, M. L., Di Gesù, R. y Craparo, E. F. (2012). Lipid nanoparticles for drug targeting to the brain. Methods in Enzymology, 508, 229-251. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-391860-4.00012-4

Borchardt, E. K., Martinez, N. M. y Gilbert, W. V. (2020). Regulation and function of RNA pseudouridylation in human cells. Annual Review of Genetics, 54, 309-336. https://doi.org/10.1146/annurev-genet-112618-043830

Bravo, E. (2003). Amicus curiae presentado a la Corte Constitucional (Ecuador). A la Acción de Protección No. 10332-2018-00640, presentada por el Gobierno Autónomo Descentralizado Municipal de Santa Ana de Cotacachi – Caso No. 1149-19-JP.

Brito, L. A., Kommareddy, S., Maione, D., Uematsu, Y., Giovani, C., Berlanda Scorza, F., Otten, G. R., Yu, D., Mandl, C. W., Mason, P. W., Dormitzer, P. R., Ulmer, J. B. y Geall, A. J. (2014). Self-amplifying mRNA vaccines. Advances in Genetics, 89, 179-233. https://doi.org/10.1016/bs.adgen.2014.10.005

Buchrieser, J., Dufloo, J., Hubert, M., Monel, B., Planas, D., Rajah, M. M., Planchais, C., Porrot, F., Guivel-Benhassine, F., Van der Werf, S., Casartelli, N., Mouquet, H., Bruel, T. y Schwartz, O. (2020). Syncytia formation by SARS-CoV-2-infected cells. The EMBO journal (2020) 39(23): e106267. Erratum in: The EMBO Journal (2021) 40(3): e107405. https://doi.org/10.15252/embj.2020106267

Buonvino, S. y Melino, S. (2020). New Consensus pattern in Spike CoV-2: potential implications in coagulation process and cell–cell fusion. Cell Death Discovery, 6, 134. https://doi.org/10.1038/s41420-020-00372-1

Cafferatta, N. A. (2004). El principio precautorio. Gaceta Ecológica, 73. 5-21.

Cafferatta, N. A. (2021). Litigios ambientales y principios de derecho ambiental. En B. Soro Mateo y J. Jordano Fraga (Dirs.), A. Álvarez Carreño (Coord), Viejos y nuevos principios del Derecho ambiental (pp. 55-72).Valencia: Tiranch Lo Blanch.

Cai, Z., Lu, C., He, J., Liu, L., Zou, Y., Zhang, Z., Zhu, Z., Ge, X., Wu, A., Jiang, T., Zheng, H. y Peng, Y. (2021). Identification and characterization of circRNAs encoded by MERS-CoV, SARS-CoV-1 and SARS-CoV-2. Briefings in Bioinformatics, 22(2), 1297-1308. https://doi.org/10.1093/bib/bbaa334

Cardozo, T. y Veazey, R. (2021). Informed consent disclosure to vaccine trial subjects of risk of COVID-19 vaccines worsening clinical disease. International Journal of Clinical Practice, 75(3), e13795. https://doi.org/10.1111/ijcp.13795

Carrasco, A. (2011). “El principio precautorio en la ciencia argentina”. Voces en el Fénix. 12/09/2011. Disponible en: https://www.vocesenelfenix.com/sites/default/files/pdf/0 90.pdf. Págs. 66 y ss.

CDC (Centers of Disease Control and Prevention). (2021). Understanding Viral Vector COVID-19 Vaccines. https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/vaccines/different-vaccines/viralvector.html#:~:text=Viral%20vector%20vaccines%20use%20a,getting%20sick%20with%20COVID%2D19.

Clay, C., Donart, N., Fomukong, N., Knight, J. B., Lei, W., Price, L., Hahn, F., Van Westrienen, J. y Harrod, K. S. (2012). Primary severe acute respiratory syndrome coronavirus infection limits replication but not lung inflammation upon homologous rechallenge. Journal of Virology, 86(8), 4234-4244. https://doi.org/10.1128/JVI.06791-11

Crommelin, D. J. A., Anchordoquy, T. J., Volkin, D. B., Jiskoot, W. y Mastrobattista, E. (2021) Addressing the cold reality of mRNA vaccine stability. Journal Pharmaceutical Science, 110(3), 997-1001. https://doi.org/10.1016/j.xphs.2020.12.006

Custers, J., Kim, D., Leyssen, M., Gurwith, M., Tomaka, F., Robertson, J., Heijnen, E., Condit, R., Shukarev, G., Heerwegh, D., van Heesbeen, R., Schuitemaker, H., Douoguih, M., Evans, E., Smith, E. R., Chen, R. T. y Brighton Collaboration Viral Vector Vaccines Safety Working Group (V3SWG). (2021). Vaccines based on replication incompetent Ad26 viral vectors: Standardized template with key considerations for a risk/benefit assessment. Vaccine, 39(22), 3081–3101. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2020.09.018

Desfarges, S. y Ciuffi, A. (2012). Viral integration and consequences on host gene expression. En G. Witzany (Ed.), Viruses: essential agents of life (pp.147-175). Dordrecht: Springer. https://doi.org/10.1007/978-94-007-4899-6_7

Duerr, A., Huang, Y., Buchbinder, S., Coombs, R. W., Sanchez, J., del Rio, C., Casapia, M., Santiago, S., Gilbert, P., Corey, L., Robertson, M. N. y Step/HVTN 504 Study Team (2012). Extended follow-up confirms early vaccine enhanced risk of HIV acquisition and demonstrates waning effect over time among participants in a randomized trial of recombinant adenovirus HIV vaccine (Step Study). The Journal of Infectious Diseases, 206(2), 258-266. https://doi.org/10.1093/infdis/jis342

Ehrenfeld, M., Tincani, A., Andreoli, L., Cattalini, M., Greenbaum, A., Kanduc, D., Alijotas-Reig, J., Zinserling, V., Semenova, N., Amital, H. y Shoenfeld, Y. (2020). Covid-19 and autoimmunity. Autoimmunity Reviews, 19(8), 102597. https://doi.org/10.1016/j.autrev.2020.102597

EMA (European Medicines Agency) (2006). Guideline on nonclinical testing for inadvertent germline transmission of gene transfer vectors. https://www.ema.europa.eu/en/non-clinical-testing-inadvertent-germline-transmission-gene-transfer-vectors#current-effective-version-section

EMA (European Medicines Agency). (2020). Zabdeno. ebola vaccine (Ad26.ZEBOV-GP [recombinant]). https://www.ema.europa.eu/en/medicines/human/EPAR/zabdeno

Fauci, A. S., Marovich, M. A., Dieffenbach, C. W., Hunter, E. y Buchbinder, S. P. (2014). Immunology. Immune activation with HIV vaccines. Science, 344(6179), 49-51. https://doi.org/10.1126/science.1250672

Eygeris, Y., Patel, S., Jozic, A. y Sahay, G. (2020). Deconvoluting lipid nanoparticle structure for messenger RNA delivery. Nano Letters, 20(6), 4543–4549. https://doi.org/10.1021/acs.nanolett.0c01386

Frendo, J. L., Olivier, D., Cheynet, V., Blond, J. L., Bouton, O., Vidaud, M., Rabreau, M., Evain-Brion, D. y Mallet, F. (2003). Direct involvement of HERV-W Env glycoprotein in human trophoblast cell fusion and differentiation. Molecular and Cellular Biology, 23(10), 3566-3574. https://doi.org/10.1128/MCB.23.10.3566-3574.2003

Gallaher, G. (febrero 2020) Response to nCoV2019 against backdrop of endogenous retroviruses. https://virological.org/t/response-to-ncov2019-against-backdrop-ofendogenous-retroviruses/396

Gao, T., Gao, Y., Liu, X., Nie, Z., Sun, H., Lin, K., Peng, H. y Wang, S. (2021). Identification and functional analysis of the SARS-COV-2 nucleocapsid protein. BMC Microbiolgy, 21(1): 58. https://doi.org/10.1186/s12866-021-02107-3

Goswami, R., Subramanian, G., Silayeva, L., Newkirk, I., Doctor, D., Chawla, K., Chattopadhyay, S., Chandra, D., Chilukuri, N. y Betapudi, V. (2019). Gene therapy leaves a vicious cycle. Frontiers in Oncology, 9, 297. https://doi.org/10.3389/fonc.2019.00297

Hacein-Bey-Abina, S., von Kalle, C., Schmidt, M., Le Deist, F., Wulffraat, N., McIntyre, E., Radford, I., Villeval, J. L., Fraser, C. C., Cavazzana-Calvo, M. y Fischer, A. (2003). A serious adverse event after successful gene therapy for X-linked severe combined immunodeficiency. The New England Journal of Medicine, 348(3), 255-256. https://doi.org/10.1056/NEJM200301163480314

Herrera, M., Kim, J., Eygeris, Y., Jozic, A. y Sahay, G. (2021). Illuminating endosomal escape of polymorphic lipid nanoparticles that boost mRNA delivery. Biomaterials Science. https://doi.org/10.1039/D0BM01947J

Hubert, B. (25 de diciembre de 2020) Reverse Engineering the source code of the BioNTech/Pfizer SARS-CoV-2 vaccine. https://berthub.eu/articles/posts/reverse-engineering-source-code-of-the-biontech-pfizer-vaccine/

Hubert, B. (12 de enero de 2021). The genetic code and proteins of the other Covid-19 vaccines. https://berthub.eu/articles/posts/genetic-code-of-covid-19-vaccines/

Huisman, W., Martina, B. E., Rimmelzwaan, G. F., Gruters, R. A. y Osterhaus, A. D. (2009). Vaccine-induced enhancement of viral infections. Vaccine, 27(4), 505–512. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2008.10.087

Hüser, D., Khalid, D., Lutter, T., Hammer, E. M., Weger, S., Heßler, M., Kalus, U., Tauchmann, Y., Hensel-Wiegel, K., Lassner, D. y Heilbronn, R. (2017). High Prevalence of Infectious Adeno-associated Virus (AAV) in Human Peripheral Blood Mononuclear Cells Indicative of T Lymphocytes as Sites of AAV Persistence. Journal of Virology, 91(4), e02137-16. https://doi.org/10.1128/JVI.02137-16

Ioannidis, J. (2021). Reconciling estimates of global spread and infection fatality rates of COVID-19: An overview of systematic evaluations. European Journal of Clinical Investigation, 51(5), e13554. https://doi.org/10.1111/eci.13554

Jafarlou, M., Baradaran, B., Saedi, T. A., Jafarlou, V., Shanehbandi, D., Maralani, M. y Othman, F. (2016). An overview of the history, applications, advantages, disadvantages and prospects of gene therapy. Journal of Biological Regulators and Homeostatic Agents, 30(2), 315-321.

Jeong, D. E., McCoy, M., Artiles, K., Ilbay, O., Fire, A., Nadeau, K., Park, H., Betts, B., Boyd, S., Hoh, R. y Shoura, M. (2021) Assemblies of putative SARS-CoV2-spike-encoding mRNA sequences for vaccines BNT-162b2 and mRNA-1273 (version 0.1Beta 03/23/21). https://github.com/NAalytics/Assemblies-of-putative-SARS-CoV2-spike-encoding-mRNA-sequences-for-vaccines-BNT-162b2-and-mRNA-1273

Kam, Y. W., Kien, F., Roberts, A., Cheung, Y. C., Lamirande, E. W., Vogel, L., Chu, S. L., Tse, J., Guarner, J., Zaki, S. R., Subbarao, K., Peiris, M., Nal, B. y Altmeyer, R. (2007). Antibodies against trimeric S glycoprotein protect hamsters against SARS-CoV challenge despite their capacity to mediate FcgammaRII-dependent entry into B cells in vitro. Vaccine, 25(4), 729-740. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2006.08.011

Karikó, K., Buckstein, M., Ni, H. y Weissman, D. (2005). Suppression of RNA recognition by Toll-like receptors: the impact of nucleoside modification and the evolutionary origin of RNA. Immunity, 23(2), 165-175. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2005.06.008

Karikó, K., Kuo, A., Barnathan, E. S. y Langer, D. J. (1998) Phosphate-enhanced transfection of cationic lipid-complexed mRNA and plasmid DNA. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) – Biomembranes, 1369(2), 320-334. https://doi.org/10.1016/S0005-2736(97)00238-1

Kostoff, R. N., Briggs, M. B., Porter, A. L., Spandidos, D. A. y Tsatsakis, A. (2020). [Comment] COVID‑19 vaccine safety. International Journal of Molecular Medicine, 46(5), 1599-1602. https://doi.org/10.3892/ijmm.2020.4733

Kudla, G., Lipinski, L., Caffin, F., Helwak, A. y Zylicz, M. (2006). High guanine and cytosine content increases mRNA levels in mammalian cells. PLoS Biology, 4(6), e180. https://doi.org/10.1371/journal.pbio.0040180

Kowalski, P. S., Rudra, A., Miao, L. y Anderson, D. G. (2019). Delivering the Messenger: Advances in Technologies for Therapeutic mRNA Delivery. Molecular Therapy, 27(4), 710-728. https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2019.02.012

Lee, W.S., Wheatley, A.K., Kent, S.J. y DeKosky, B. J. (2020). Antibody-dependent enhancement and SARS-CoV-2 vaccines and therapies. Nature Microbiology, 5,1185-1191. https://doi.org/10.1038/s41564-020-00789-5

Liu, L., Wei, Q., Lin, Q., Fang, J., Wang, H., Kwok, H., Tang, H., Nishiura, K., Peng, J., Tan, Z., Wu, T., Cheung, K. W., Chan, K. H., Alvarez, X., Qin, C., Lackner, A., Perlman, S., Yuen, K. Y. y Chen, Z. (2019). Anti-spike IgG causes severe acute lung injury by skewing macrophage responses during acute SARS-CoV infection. JCI insight, 4(4), e123158. https://doi.org/10.1172/jci.insight.123158

Lu, C. y Li, P. (2012). Preparation of short RNA by in vitro transcription. Methods in Molecular Biology, 941, 59-68. https://doi.org/10.1007/978-1-62703-113-4_5

Lyons-Weiler, J. (2020). Pathogenic priming likely contributes to serious and critical illness and mortality in COVID-19 via autoimmunity. Journal of Translational Autoimmunity, 3, 100051. https://doi.org/10.1016/j.jtauto.2020.100051

Mariño López, A. (2009). La transformación de la obligación de informar al consumidor. Incidencia del paradigma de la precaución en el derecho del consumo. Revista Crítica de Derecho Privado, 6, 875-893.

Mariño López, A. (2019). Principio precautorio, protección de consumidores y obligación de informar en el Anteproyecto de Ley de Defensa del Consumidor. En F. G. Santarelli y D. A. Chamatropulos (Dirs.), Comentarios al anteproyecto de ley de defensa del consumidor – Homenaje a Rubén S. Stiglitz (pp. 883-898). CABA: La Ley.

Mathieu, E., Ritchie, H., Ortiz-Ospina, E., Roser, M., Hasell, J., Appel, C., Giattino C. y Rodés-Guirao, L. (2021). A global database of COVID-19 vaccinations. Nature Human Behaviour. https://doi.org/10.1038/s41562-021-01122-8

Mirande, S. (2009). ‘Precaver el desarrollo de lo desconocido’. Riesgo de desarrollo, información y precaución en el Derecho uruguayo. Revista Crítica de Derecho Privado, 6, 617-640.

Mirande, S. (2020). Deconstruir el desarrollo de lo desconocido. Interpretación precautoria de textos normativos en la expansión sistemática de la precaución como pauta interpretativa. En S. Carnelli (Dir.), Anuario de Derecho Civil Uruguayo. Tomo L. Nro. 17 (pp. 893-905). Uruguay: La Ley.

Mitani, K. y Kubo, S. (2002). Adenovirus as an integrating vector. Current Gene Therapy, 2(2), 135-144. https://doi.org/10.2174/1566523024605591

Mizutani, T. (2007) Signal transduction in SARS-CoV-infected cells. Annals of the New York Academy Sciences, 1102(1), 86-95. https://doi.org/10.1196/annals.1408.006

Moderna’s stock market launch. (9 de noviembre de 2018). https://www.sec.gov/Archives/edgar/data/1682852/000119312518323562/d577473ds1.htm

Munoz, F. M., Cramer, J. P., Dekker, C. L., Dudley, M. Z., Graham, B. S., Gurwith, M., Law, B., Perlman, S., Polack, F. P., Spergel, J. M., Van Braeckel, E., Ward, B. J., Didierlaurent, A. M., Lambert, P. H. y Brighton Collaboration Vaccine-associated Enhanced Disease Working Group. (2021). Vaccine-associated enhanced disease: Case definition and guidelines for data collection, analysis, and presentation of immunization safety data. Vaccine, 39(22), 3053–3066. https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2021.01.055

Nguyen, H. T., Zhang, S., Wang, Q., Anang, S., Wang, J., Ding, H., Kappes, J. C. y Sodroski, J. (2020). Spike glycoprotein and host cell determinants of SARS-CoV-2 entry and cytopathic effects. Journal of Virology, 95(5), e02304-20. https://doi.org/10.1128/JVI.02304-20

Pallesen, J., Wang, N., Corbett, K. S., Wrapp, D., Kirchdoerfer, R. N., Turner, H. L., Cottrell, C. A., Becker, M. M., Wang, L., Shi, W., Kong, W. P., Andres, E. L., Kettenbach, A. N., Denison, M. R., Chappell, J. D., Graham, B. S., Ward, A. B. y McLellan, J. S. (2017). Immunogenicity and structures of a rationally designed prefusion MERS-CoV spike antigen. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 114(35), E7348–E7357. https://doi.org/10.1073/pnas.1707304114

Pardi, N., Hogan, M. J., Porter, F. W. y Weissman, D. (2018). mRNA vaccines – a new era in vaccinology. Nature reviews. Drug Discovery, 17(4), 261-279. https://doi.org/10.1038/nrd.2017.243

Patra, T., Meyer, K., Geerling, L., Isbell, T. S., Hoft, D. F., Brien, J., Pinto, A. K., Ray, R. B. y Ray, R. (2020). SARS-CoV-2 spike protein promotes IL-6 trans-signaling by activation of angiotensin II receptor signaling in epithelial cells. PLoS Pathogens, 16(12): e1009128 https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1009128

Petrillo, M., Brogna, C., Cristoni, S., Querci, M., Piazza, O. y Van den Eede, G. (2020). Increase of SARS-CoV-2 RNA load in faecal samples prompts for rethinking of SARS-CoV-2 biology and COVID-19 epidemiology (Version v1). Zenodo. http://doi.org/10.5281/zenodo.4088208

Petruk, G., Puthia, M., Petrlova, J., Samsudin, F., Strömdahl, A. C., Cerps, S., Uller, L., Kjellström, S., Bond, P. J. y Schmidtchen, A. A. (2021). SARS-CoV-2 spike protein binds to bacterial lipopolysaccharide and boosts proinflammatory activity. Journal of Molecular Cell Biology, 12(12), 916–932. https://doi.org/10.1093/jmcb/mjaa067

Pillaiyar, T., Meenakshisundaram, S. y Manickam, M. (2020). Recent discovery and development of inhibitors targeting coronaviruses. Drug Discovery Today, 25(4), 668–688. https://doi.org/10.1016/j.drudis.2020.01.015

Polack, F. P., Thomas, S. J., Kitchin, N., Absalon, J., Gurtman, A., Lockhart, S., Perez, J. L., Pérez Marc, G., Moreira, E. D., Zerbini, C., Bailey, R., Swanson, K. A., Roychoudhury, S., Koury, K., Li, P., Kalina, W. V., Cooper, D., Frenck, R. W., Jr, Hammitt, L. L., Türeci, Ö., … y C4591001 Clinical Trial Group. (2020). Safety and efficacy of the BNT162b2 mRNA Covid-19 vaccine. The New England Journal of Medicine, 383(27), 2603-2615. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2034577

Pollard, A. J., Bijker, E. M. (2021) A guide to vaccinology: from basic principles to new developments. Nature Reviews Immunology, 21(2), 83-100. https://doi.org/10.1038/s41577-020-00479-7. Erratum en: Nature Reviews Immunology, 21, 129. https://doi.org/10.1038/s41577-020-00497-5

Potapov, V., Fu, X., Dai, N., Corrêa, I. R., Jr, Tanner, N. A. y Ong, J. L. (2018). Base modifications affecting RNA polymerase and reverse transcriptase fidelity. Nucleic Acids Research, 46(11), 5753-5763. https://doi.org/10.1093/nar/gky341

Rhea, E. M., Logsdon, A. F., Hansen, K. M., Williams, L. M., Reed, M. J., Baumann, K. K., Holden, S. J., Raber, J., Banks, W. A. y Erickson, M. A. (2021). The S1 protein of SARS-CoV-2 crosses the blood-brain barrier in mice. Nature Neuroscience, 24(3), 368-378. https://doi.org/10.1038/s41593-020-00771-8

Röttger-Wirtz, S.(2020). Case C-616/17 Blaise and Others: The precautionary principle and its role in judicial review – Glyphosate and the regulatory framework for pesticides. Maastricht Journal of European and Comparative Law, 27(4), 529-542. https://doi.org/10.1177/1023263X20949424

Shyu, A. B., Wilkinson, M. F. y van Hoof, A. (2008). Messenger RNA regulation: to translate or to degrade. The EMBO Journal, 27(3), 471-481. https://doi.org/10.1038/sj.emboj.7601977

Song, L., Samulski, R. J. y Hirsch, M. L. (2020). Adeno-Associated Virus Vector Mobilization, Risk Versus Reality. Human Gene Therapy, 31(19-20), 1054-1067. https://doi.org/10.1089/hum.2020.118

Sousa, A., Martínez-Albarracín, M. J. y Zaragoza Velilla, A. (2021). mRNA, nanolipid particles and PEG: a triad never used in clinical vaccines is going to be tested on hundreds of millions of people. Biomedical Journal of Scientific and Techichal Research, 34(1), 26444-26451.

Sozzo, G. (2008). “Riesgos del desarrollo y sistema de derecho de daños”. Revista Crítica de Derecho Privado. Nro. 5. Págs. 527 y ss.

Sozzo, G. (2015). La protección del consumidor a través del principio precautorio. En G. Stiglitz y C. Hernández (Dirs.), Tratado de Derecho del Consumidor. Tomo III (pp. 197-258). CABA: La Ley.

Stone, C. A., Jr, Liu, Y., Relling, M. V., Krantz, M. S., Pratt, A. L., Abreo, A., Hemler, J. A. y Phillips, E. J. (2019). Immediate hypersensitivity to polyethylene glycols and polysorbates: more common than we have recognized. The Journal of Allergy and Clinical Immunology in Practice, 7(5), 1533-1540.e8. https://doi.org/10.1016/j.jaip.2018.12.003

Suzuki, Y. J. y Gychka, S. G. (2021). SARS-CoV-2 spike protein elicits cell signaling in human host cells: implications for possible consequences of COVID-19 vaccines. Vaccines, 9(1), 36. https://doi.org/10.3390/vaccines9010036

Suzuki, Y. J., Nikolaienko, S. I., Dibrova, V. A., Dibrova, Y. V., Vasylyk, V. M., Novikov, M. Y., Shults, N. V. y Gychka, S. G. (2020). SARS-CoV-2 spike protein-mediated cell signaling in lung vascular cells. Vascular Pharmacology, 137, 106823. https://doi.org/10.1016/j.vph.2020.106823

Takano, T., Yamada, S., Doki, T. y Hohdatsu, T. (2019). Pathogenesis of oral type I feline infectious peritonitis virus (FIPV) infection: Antibody-dependent enhancement infection of cats with type I FIPV via the oral route. The Journal of Veterinary Medical Science, 81(6), 911-915. https://doi.org/10.1292/jvms.18-0702

Tanmay, S., Labrou, D., Farsalinos, K. y Poulas, K. (2021). Is SARS-CoV-2 Spike glycoprotein impairing macrophage function via α7-nicotinic acetylcholine receptors?. Food and Chemical Toxicology, 152, 112184. https://doi.org/10.1016/j.fct.2021.112184

Teijaro, J.R. y Farber, D.L. (2021). COVID-19 vaccines: modes of immune activation and future challenges. Nature Reviews Immunology, 21,195-197. https://doi.org/10.1038/s41577-021-00526-x

Tinari, S. (2021). The EMA covid-19 data leak, and what it tells us about mRNA instability. BMJ, 372, n627. https://doi.org/10.1136/bmj.n627

Tseng, C. T., Sbrana, E., Iwata-Yoshikawa, N., Newman, P. C., Garron, T., Atmar, R. L., Peters, C. J. y Couch, R. B. (2012). Immunization with SARS coronavirus vaccines leads to pulmonary immunopathology on challenge with the SARS virus. PLoS ONE, 7(4), e35421. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0035421. Erratum in: PLoS ONE, 7(8): 10.1371/annotation/2965cfae-b77d-4014-8b7b-236e01a35492. https://doi.org/10.1371/annotation/2965cfae-b77d-4014-8b7b-236e01a35492

Tsukui, T., Kanegae, Y., Saito, I. y Toyoda, Y. (1996). Transgenesis by adenovirus-mediated gene transfer into mouse zona-free eggs. Nature Biotechnology, 14, 982-985. https://doi.org/10.1038/nbt0896-982

UCCSNAL (3 de noviembre de 2020). Pronunciamiento de UCCSNAL sobre nuevas vacunas genéticas o transgénicas en context de Sars Covid19. http://uccsnal.org/

Vadalà, M., Poddighe, D., Laurino, C. y Palmieri, B. (2017). Vaccination and autoimmune diseases: is prevention of adverse health effects on the horizon?. The EPMA Journal, 8(3), 295–311. https://doi.org/10.1007/s13167-017-0101-y

Vanden Bossche, G. (2021) The science behind the catastrophic consequences of thoughtless human interventon in the Covid-19 pandemic. https://www.geertvandenbossche.org/post/seriesofpublications

V’kovski, P., Kratzel, A., Steiner, S., Stalder, H. y Thiel, V. (2021). Coronavirus biology and replication: implications for SARS-CoV-2. Nature Reviews. Microbiology, 19(3), 155–170. https://doi.org/10.1038/s41579-020-00468-6

von Hundelshausen, P., Lorenz, R., Siess, W. y Weber, C. (2021). Vaccine-Induced Immune Thrombotic Thrombocytopenia (VITT): Targeting Pathomechanisms with Bruton Tyrosine Kinase Inhibitors. Thrombosis and haemostasis, 10.1055/a-1481-3039. Advance online publication. https://doi.org/10.1055/a-1481-3039

Weng, Y., Li, C., Yang, T., Hu, B., Zhang, M., Guo, S., Xiao, H., Liang, X. J. y Huang, Y. (2020). The challenge and prospect of mRNA therapeutics landscape. Biotechnology Advances, 40, 107534. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2020.107534

White, J. M., Delos, S. E., Brecher, M. y Schornberg, K. (2008). Structures and mechanisms of viral membrane fusion proteins: multiple variations on a common theme. Critical Reviews in Biochemestry and Molecular Biology, 43(3), 189-219. https://doi.org/10.1080/10409230802058320

Wylon, K., Dölle, S. y Worm, M. (2016). Polyethylene glycol as a cause of anaphylaxis. Allergy, Asthma and Clinical Immunology, 12, 67. https://doi.org/10.1186/s13223-016-0172-7

Xia, X. (2021). Domains and Functions of Spike Protein in Sars-Cov-2 in the Context of Vaccine Design. Viruses, 13(1), 109. https://doi.org/10.3390/v13010109

Zarghampoor, F., Azarpira, N., Khatami, S. R., Behzad-Behbahani, A. y Foroughmand, A. M. (2019). Improved translation efficiency of therapeutic mRNA. Gene, 707, 231-238. https://doi.org/10.1016/j.gene.2019.05.008

Zeng, W., Liu, G., Ma, H., Zhao, D., Yang, Y., Liu, M., Mohammed, A., Zhao, C., Yang, Y., Xie, J., Ding, C., Ma, X., Weng, J., Gao, Y., He, H. y Jin, T. (2020). Biochemical characterization of SARS-CoV-2 nucleocapsid protein. Biochemical and Biophysical Research Communications, 527(3), 618-623. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2020.04.136

Zhang, S., Liu, Y., Wang, X., Yang, L., Li, H., Wang, Y., Liu, M., Zhao, X., Xie, Y., Yang, Y., Zhang, S., Fan, Z., Dong, J., Yuan, Z., Ding, Z., Zhang, Y. y Hu, L. (2020). SARS-CoV-2 binds platelet ACE2 to enhance thrombosis in COVID-19. Journal of Hematology & Oncology, 13(1), 120. https://doi.org/10.1186/s13045-020-00954-7

Zhang, L., Richards, A., Barrasa, M. A., Hughes, S. H., Young, R. A. y Jaenisch, R. Reverse-transcribed SARS-CoV-2 RNA can integrate into the genome of cultured human cells and can be expressed in patient-derived tissues. (2021). Proceedings of the National Academy of Sciences, 118(21), e2105968118. https://doi.org/10.1073/pnas.2105968118

Zimmer, C., Corum, J. y Sui-Lee, W. (10 de mayo de 2021). Coronavirus Vaccine Tracker. The New York Times. https://www.nytimes.com/interactive/2020/science/coronavirus-vaccine-tracker.html

Bajo la Lupa.uy "For Export" actualidad politica y opinión.

Buscar este blog